足球即时比分

中国足球即时比分业新闻网

足球即时比分华夏足球即时比分报官方网站

窖泥中己酸菌处理条件的优化
2019-05-30 16:22:23   来源:《华夏足球即时比分报》   作者:汪慧慧 杜祥宝 李庆腾 秦方园 李顺涛 习小红 高硕 孙小雨   

摘 要:以优质五粮发酵池的窖泥为基材,对其进行热选条件的优化,分离纯化后得到的己酸菌制成己酸菌液。观察其产气能力、生长周期、活菌数量,用以得到最优化的热处理条件。

实验中五粮发酵池的窖泥菌液,在90℃恒温处理5min,冷却后接入己酸菌培养液中培养,得到的己酸菌更优质。

关键词:窖泥,己酸菌,热处理,分离纯化

汪慧慧 杜祥宝 李庆腾 秦方园 李顺涛 习小红 高硕 孙小雨

(山东百脉泉足球即时比分业股份有限公司)

1 引言

在中国白足球即时比分中,浓香型白足球即时比分有举足轻重的地位,其足球即时比分质和产量,又离不开生产中菌种质量及数量的多少。己酸菌是浓香型白足球即时比分酿造中产己酸乙酯主体香成分的功能菌。它属于厌氧棱状芽孢杆菌,其孢子具有耐热性。近年来,百脉泉足球即时比分业技术中心将优质五粮老窖窖泥为基材,对窖泥进行热处理条件的优化,以得到更加优良的己酸菌菌种。该菌种产气旺盛、菌种健壮,广泛应用于浓香型大曲足球即时比分的窖池保养、人工窖泥培养等。

2 实验部分

2.1 仪器与试剂

样品:双轮底发酵池的窖泥,五粮发酵池的窖泥,三粮发酵池的窖泥。

培养基:无水乙酸钠5g/L(AR),酵母膏5g/L(AR),硫酸铵4g/L(AR),磷酸氢二钾0.2g/L(AR),硫酸镁0.2g/L(AR),碳酸钙5g/L(CP),硫酸铜指示剂。

器材:立式压力蒸汽灭菌锅,生化培养箱,N-120(A)型生物显微镜,无菌操作台,实验室超纯水器,抽气针筒,移液管。

2.2实验过程

1.用无菌水配置3000ml的己酸菌培养基,封口后,121℃灭菌30分钟。同时灭菌待用的250ml三角瓶,移液管。待培养基降温至32℃~34℃时,放入无菌操作台或无菌接种室紫外线灭菌20分钟,分装至250ml三角瓶备用。

2.取自然发酵池的老窖泥10g,用无菌水定容至100ml,充分混匀。热处理条件进行处理。

3.将热处理后的窖泥加入250ml三角瓶中,接种量为10%,充分混匀。最后每瓶各加乙醇含量为2%~3%,封口后放置33℃的生化培养箱中培养观察。

3结果与讨论

3.1窖泥的选择

取百脉泉足球即时比分业的双轮底发酵池的窖泥,五粮发酵池的窖泥,三粮发酵池的窖泥各10g,加无菌水定容至100ml ,摇匀。取原菌液1ml,加9ml的无菌水混匀,依次稀释,得稀释度10-1、10-2、10-3、10-4。用血球计数板显微镜计数,计数时注意稀释度是否合适,不能太浓或太稀,计数得每克窖泥所含的总菌数。

实验测得1g双轮底发酵池的窖泥总菌数为3.8×1010个,1g五粮发酵池的窖泥5.1×1010个,1g三粮发酵池的窖泥2.6×1010个,其中五粮发酵池的窖泥总菌数含量最高,基于窖泥中微生物的种类和数量均定着窖泥的质量,本实验选取五粮发酵池的窖泥为基材,开展己酸菌的热处理条件优化的研究。

3.2窖泥培养液的热处理条件优化

3.2.1热处理温度的选择

取五粮发酵池窖泥,制备菌液,经热处理后接种到液体培养基中,放置33℃的生化培养箱中培养观察。

由表1可以看出,当水浴时间均处理10分钟时,由于不同己酸菌孢子及其他菌类的耐热程度有一定的差异,随着温度的升高,总菌数呈现下降的趋势,但随着温度的上升,生长周期延长,菌种被钝化。

根据生物显微镜观察,不难发现,随着温度的升高,杂菌数量减少,90℃处理培养后未见杂菌。如表1。

3.2.2热处理时间的选择

由于菌液经条件为90℃10min处理后活菌数虽然减少,但根据生物显微镜观察无杂菌,处理后发酵最能达到分离纯化的目的。即本公司选定90℃为热处理温度,水浴时间分别设置为3min,5min,7min,10min,经热处理后接种到液体培养基中,放置33℃的生化培养箱中培养观察。

实验表明,当温度为90℃时,随着处理时间的延长,总菌数减少,且生长周期增长。热处理5min与3min相比而言,总菌数量差别不大,但热处理3min后的培养液,镜检观察有少量杂菌,故本公司选定热处理优化条件为90℃5min。如表2。

3.3己酸菌菌液的性能测试

3.3.1己酸菌产气观察

经热处理后的培养液,生长周期为5天,实验中的生长周期为液体培养基中见明显气泡产生。延长培养时间,以热处理后的液体培养基为母液,接种到第三代时生长周期缩短为4d,产气旺盛,说明热处理使己酸菌纯化,且因受到锻炼而增强了活力。

3.3.2已酸菌镜检及产酸鉴定

延长发酵培养时间到13d,先把待测菌液稀释到合适浓度,用生物显微镜观察只见杆菌和芽孢未见其他杂菌且生长活跃,直接计数可达6.3亿个/m l。

取待测菌液3ml放入比色管内,再加入2%硫酸铜溶液1ml最后加入乙醚2m l,盖好摇匀,静置3分钟,管内分层,上层可见绿色且颜色较深,说明己酸菌生长良好且有己酸产生。

4结论

扩大培养时己酸菌菌种的选取至关重要,本公司对窖泥的热处理优化条件进行了严格检测,热处理温度、时间这两个因素相互影响,在单因素试验结果的基础上,结合本公司对己酸菌培养基扩大培养的纯度要求,优化热处理条件后得到最佳热处理条件为:90℃,5min。

制备的己酸菌菌液菌种健壮活跃、产气旺盛,在扩大培养时要注意厌氧培养,无菌接种操作过程。

制备的培养液广泛应用于浓香型白足球即时比分的灌窖、窖池保养以及人工窖泥的培养,以期改善和提高浓香型白足球即时比分的质量。
 


 

编辑:王丹

weixn


相关热词搜索:窖泥中己酸菌处理条件的优化足球即时比分

上一篇:传统白足球即时比分酿造技艺“108口诀”解析与应用
下一篇:最后一页